Update Artikelilmiah: 6997

MUHIMATUL UMAMI

NIM

Judul Artikel

Abstrak (Bhs. Indonesia)

Isolasi sel merupakan langkah pertama dalam kultur sel spermatogenik. Salah satu teknik isolasi sel yang terbukti efisien adalah gradien sentrifugasi. Tujuan penelitian ini adalah mengidentifikasi dan mengevaluasi karakter sel-sel spermatogenik ikan Nilem (Osteochilus hasselti C.V.) yang diisolasi menggunakan gradien sentrifugasi sukrosa pada berbagai konsentrasi serta menentukan konsentrasi sukrosa yang efisien untuk isolasi sel-sel spermatogenik ikan Nilem (O. hasselti). Penelitian ini dilaksanakan secara eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan dan 7 ulangan. Perlakuan yang diujikan adalah gradien konsentrasi sukrosa yaitu perlakuan A (10%, 15%, 20% dan 25%), B (15%, 20%, 25% dan 30%), C (20%, 25%, 30% dan 35%) dan D (25%, 30%, 35% dan 40%). Suspensi testis diisolasi dengan gradien uji dengan kecepatan 400 g selama 10 menit. Data penelitian meliputi morfologi, kepadatan, dan viabilitas sel serta proporsi tahapan sel spermatogenik pada setiap interfase gradien dianalisis dengan ANOVA satu arah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa gradien sentrifugasi sukrosa dengan konsentrasi yang berbeda membentuk empat interfase yang dapat diamati dengan jelas. Gradien sentrifugasi sukrosa mengisolasi empat tipe sel yang dikategorikan sebagai sel spermatogenik (meliputi spermatogonia, spermatosit, spermatid dan spermatozoa) dan satu tipe sel yang dikategorikan sebagai sel somatik yaitu sel sertoli dari suspensi sel hasil disosiasi testis ikan Nilem. Kepadatan sel bervariasi antar interfase pada masing-masing gradien (p<0,05), kepadatan sel meningkat dari konsentrasi terendah (interfase paling atas) hingga konsentrasi tertinggi (interfase paling bawah) dengan proporsi sel spermatogenik yang didominasi oleh spermatozoa. Viabilitas sel hasil sentrifugasi sukrosa pada semua konsentrasi yang diujikan berkisar antara 70,25 ± 4,84 % hingga 88,71 ± 10,68%. Hasil analisis menunjukkan bahwa viabilitas sel spermatogenik pada antar interfase dari seluruh gradien uji tidak berbeda secara signifikan (p>0,05) namun konsentrasi sukrosa yang diujikan memberikan pengaruh terhadap viabilitas sel (p<0,05), viabilitas sel terendah diperoleh dari gradien sentrifugasi D sedangkan viabilitas tertinggi diperoleh dari gradien A dan B.

Abtrak (Bhs. Inggris)

Cell isolation is the first important step in the spermatogenic cell culture. One of the cell isolation techniques had been used was Sucrose gradient centrifugation. The purpose of this study were to identify and evaluate the character of Nilem fish (Osteochilus hasselti C.V.) spermatogenic cells isolated using sucrose gradient centrifugation at various concentrations and to determine the efficient concentration of sucrose to isolate spermatogenic cells. This research was carried out experimentally using completely randomized design with four treatments and seven replicates. The tested treatments were sucrose gradient concentrations namely A ( 10 % , 15 % , 20 % and 25 % ), B ( 15 % , 20 % , 25 % and 30 % ), C ( 20 % , 25 % , 30 % and 35 % ), and D ( 25 % , 30 % , 35 % and 40 % ). Testicular suspensions were load to each gradient and centrifuged at 400 g for 10 minutes.  Research data consisted of cell morphology, density, and cell viability as well as the proportion of spermatogenic cell in each interphase gradient was analyzed using one-way ANOVA. The results showed that each sucrose gradient centrifugation form four distinct interphase. Four cell types which were categorized as spermatogenic cells (consisted of spermatogonia, spermatocytes, spermatids and spermatozoa) and one somatic cell type, the Sertoli cells were identified in all tested gradient. Cell density were varies amongst interphase gradients (p<0.05), cell density increased from top layer (lowest concentration) to bottom layer (highest concentration) with proportion of spermatogenic cells was dominated by spermatozoa. Cell viability resulted from all concentrations tested ranged from 70.25 ± 4.84 % and 88.71 ± 10.68 %. Cell viability was not significantly different amongst gradient interphase (p>0.05) but significantly different amongst sucrose gradient (p<0.05). The lowest cell viability was obtained from gradient centrifugation D while highest viability was obtained from gradient A and B.

Kata kunci

Pembimbing 1

Pembimbing 2

Pembimbing 3

Tahun

Jumlah Halaman